goodrugator

Тесты для идентификации. Морфология возбудителя. Рост на питательных средах. 1% пептонная вода – голубая пленка. Щелочной агар – среднии колонии голубоватого цвета.

• Реферат На Тему Особо Опасные Инфекции
• Карантинные Инфекции
• Скачать Реферат На Тему Особо Опасные Инфекции

Среда TBRS – колонии желтого цвета. Изучение антигенных свойств.

Особо опасные инфекции Медицина. На сайте allRefs.net есть практически любой реферат, курсовая.

• Реферат: Особо опасные болезни растений. Доступно вам для легкого и полноценного списывания.
• Реферат: Понятие «особо опасные. «Понятие «особо опасные инфекции». => Рефераты на тему.
• ОСОБО ОПАСНЫЕ ИНФЕКЦИИ (КАРАНТИННЫЕ, КОНВЕНЦИОННЫЕ) Холера. Тема семинара: «Здоровье.

Сахаролитические свойства. Лактоза, арабиноза, дульцит – Глюкоза, сахароза, манит, манноза, мальтоза → к. Протеолитические свойства. Разложение желатина, пептонизация молока + Разложение мочевины (V. Cholerae +, V.

Eltor - ). Проба на оксидазу. Оксидаза +.

Чувствительность к фагам. Ускоренные методы Реакция иммобилизации.

На предметное стекло наносят 2 капли испражнений или материала с поверхности пептонной воды. К 1-ой капле добавляют одну каплю О-сыворотки (1:100), ко 2-ой – каплю физ раствора. Каждую каплю эмульгируют пастеровской петлей или пипеткой, накрывают покровным стеклом и просматривают под микроскопом.

При положительном результате в первой капле прекращается движение вибрионов, во второй наблюдается движение. Люминисцентно-серологический метод.

Тесты для идентификации культуры. Морфология возбудителя. Биполярность (окраска метиленовым синим).

Рост на питательных средах. МПА – через 48 часов «кружевной платочек». МПБ – «сталактитовый рост» Скошенный агар – вязкий серый налет. Изучение антигенных свойств.

Сахаролитические свойства. Мальтоза, арабиноза, глюкоза (не всегда), маннит → к Сахароза, рамноза -.

Протеолитические свойства. Разложение желатина, свертывание молока -.

H 2S +. Биологическая проба. Чувствительность к фагам. Дифференциация возбудителей чумы от возбудителя.

Признаки Возбудитель чумы Возбудитель псевдотуберкулеза Подвижность Рост на голодной среде Чумной бактериофаг Расщепление рамнозы Образование мочевины Свертывание молока Лакмусовое молоко Фибринолитические св-ва Патогенность для животных Неподвижен Не растет Лизируется -Медленное ощелачивание Обладает Убивает морских свинок и крыс Подвижен Растет Не лизируется + + + Быстрое ощелачивание Не обладает Морских свинок убивает, крыс не убивает Тесты для идентификации культуры. Морфология возбудителя. Окраска по Романовскому – нежно-фиолетовые. Аллергическая проба. Пробу ставят на 3– 5день заболевания. А) накожный метод: тулярин (1 мл – 10 млрд.

Убитых микробных клеток). Пробу ставят на наружной поверхности плеча. Положительная реакция – гиперемия и отечность вокруг насечки диаметром 1–2 см через 48–72 часа. Б) внутрикожный метод: взвесь убитых бактерий (1 мл – 500 млн. Микробных клеток). Пробу ставят на ладонной поверхности предплечья.

Положительная реакция – отечность и гипермия через 24 – 48 часов. Серологическая диагностика. Линейная реакция агглютинации: 2 – 3 мл крови из локтевой вены берут в пробирку. Полученную сыворотку разводят 1:50 до 1:1600. Диагностическим титром является положительный результат реакции в разведении сыворотки от 1:100 и выше. Антигеном служит туляремийный диагностикум – убитая формалином взвесь бактерий (1 мл – 25 млрд. Микробных тел).

Черчение 8 класс программа. Рабочая программа составлена на основе федеральной программы по черчению для общеобразовательных школ, рекомендованной Министерством образования РФ (авт. Графический язык рассматривается как язык делового общения, принятый в науке, технике, искусстве, содержащий геометрическую, эстетическую, техническую и технологическую информацию. А.Д.Ботвинников, И.С.Вышнепольский, В.А.Гервер, М.М.Селиверстов). Современное графическое образование подразумевает хорошую подготовку в области изобразительного искусства, черчения, начертательной геометрии, технологии, и других учебных дисциплин, а также владение программами компьютерной графики.

РНГА: сыворотку разводят от 1:100 до 1:10000. Антиген – туляремийный эритроцитарный диагностикум. Диагностическим титром считают титр 1:100 и выше. Биологическая проба. Люминисцентно-микроскопический метод. Тесты для идентификации культуры. Морфология возбудителя.

В мазке располагаются беспорядочно. Бактериологический метод. Производят посев крови во флаконы, в которые наливают по 30 – 50 мл агара. В каждый флакон заливают по 25 – 30 мл простерилизованного бульона.

Эту среду выдерживают в термостате 2 – 3 дня, после чего добавляют по 5 мл в каждый флакон. При положительном результате на поверхности появляются колонии – мелкие, бесцветные, выпуклые с зернистостью.

Серологическая диагностика. Реакция Райта. Берут 1 – 2 мл крови из пальца.

Получают сыворотку. Разводят 1:25 до 1:1600.

Диагностическим титром является положительный результат реакции в разведении сыворотки от 1:100 и выше (при титре 1:400 – реакция резко положительная). Антигеном служит туляремийный диагностикум – убитая культура бруцелл. Аллергическая проба. Внутрикожно в ладонную поверхность предплечья вводят 0,1 мл бруцеллина.

Результат реакции учитывают через 24 – 48 часов. Положительная ракция характеризуется отеком и гиперемией размером 46 см.

Биологическая проба. Метод иммунофлюоресценции. Тесты для идентификации культуры. Морфология возбудителя. Рост на питательных средах.

МПА – «голова медузы» или «львиная грива» МПБ – придонный рост в виде «комка ваты» Желатин – «перевернутая елочка». Изучение антигенных свойств. Сахаролитические свойства. Глюкоза, лактоза, мальтоза, левулеза → к. Протеолитические свойства.

Разложение желатина, пептонизация молока + Медленное свертывание молока. Гемолитические свойства. Не вызывает гемолиз, в отличии от антракоида. Чувствительность к фагам.

Биологическая проба. «Жемчужное ожерелье»: К бульону Хоттингера прибавляют 30% инактивированной сыворотки и пенициллин из расчета 0,5 ЕД на 1 мл бульона. 3 часа в термостате.

Делают мазок. Фиксируют жидкостью Карнуа (этиловый спирт, хлороформ и ледяная уксусная кислота). Окрашивают метиленовым синим и микроскопируют. Результат действия пенициллина – цепи шаров, на поминающих «жемчужное ожерелье».

Аллергическая проба. Внутрикожно на внутренней поверхности предплечья вводят антраксин. Реакцию учитывают через 24 – 48 часов.

Положительная реакция проявляется с первых дне заболевания. Реакция Асколи. Приготовление антигена: исследуемый материал измельчают, заливают 25 – 50 кратным объемом физ раствора и кипятят. Полученный экстракт фильтруют.

Для реакции используют преципитирующую сибиреязвенную сыворотку и для контроля сибиреязвенный антиген. Постановка реакции: 1-ая пробирка – преципитирующая сыворотка + исследуемый термоэкстракт; 2-ая пробрка – преципитирующая сыворотка + стандартный сибереязвенный антиген (контроль); 3-я пробирка – преципитирующая сыворотка + термоэкстракт из шерсти здорового живтного (контроль). При положителной реакции первых 2 пробирках образуется преципитационное кольцо, а в 3 – кольцо отсутствует.

Реферат на тему: «Особо опасные инфекции» Содержание: 1. Особо опасные инфекции3 2. Общие принципы экспресс-диагностики состояний инфекции и иммунитета.3 3. Туляремия.9 4.

Иммуноблотинг11 6.Список используемой литературы.13 Особо опасные инфекции (ООИ) - это инфекции, которые могут возникать среди населения в виде отдельных заболеваний, эпидемий и даже пандемий, чаще сопровождая ЧС (стихийные бедствия, войны, массовый голод и т.п.), характеризующиеся природной очаговостью, быстрым распространением и тяжелым течением. Единого во всем мире мнения о том, какие инфекции следует причислять к ООИ пока нет, отечественные эпидемиологи придерживаются такого перечня: Чума Туляремия Миелоидоз Геморрагические лихорадки Желтая лихорадка Холера Генерализованная форма сибирской язвы Наиболее вероятное появление ООИ возможно во время ЧС. Резкое ухудшение санитарно-гигиенических условий обостряет эпидемическую ситуацию по инфекциям, которые раннее имели эндемических характер, а завезение инфекции извне прибывающими лицами приводит к тому, что потенциальные источники инфекции оказываются неизолированными и в течение длительного времени имеют многочисленные контакты с окружающими их лицами.

В связи с этим до установления окончательного диагноза заболевания соблюдается строгий противоэпидемический режим. При первых признаках или подозрении на ООИ осуществляется: Выявление контактных лиц и их обсервация; Дача антибиотиков широкого спектра действия (доксицилин, тетрациклин и др.), т.е. Экстренная профилактика; Проведение дезинфекционных мероприятий; Отбор материала от больных и доставка его в лабораторию для микробиологического исследования; Организация частичной (полной) санобработки конкретных лиц. В данной работе разбирается этап диагностики ООИ на примере чумы, холеры и туляремии. Если диагноз установлен с достаточной достоверностью, можно определить характер противоэпидемических мероприятий, установить возможный источник инфекции и механизмы его передачи. Супер невестка 2.

Именно по этому необходимо и оправдано применение экспресс-методов диагностики ООИ. Общие принципы экспресс-диагностики состояний инфекции и иммунитета Современная иммунология исключительно многолика, а сферы применения иммунологических знаний и методов беспредельно разнообразны. Они используются практически во всех разделах биологии, ветеринарии и медицины - от фундаментальных молекулярно-биологических исследовании до медико-генетического консультирования и множества других сугубо практических процедур, осуществляемых растениеводами, животноводами и медиками. И, тем не менее, особенно важным в социальном отношении и методически наиболее передовым продолжает быть тот старейший и неуклонно развивающейся раздел иммунологии, успехами которого обеспечивается развитие теории и осуществление практики противоэпидемической работы-диагностики, профилактики и лечения инфекционных заболеваний. А методы иммунологической экспресс-диагностики имеют ключевое значение для эффективного решения названных проблем и осуществления всех соответствующих противоэпидемических мероприятий. Следующие ниже материалы и посвящены именно этому разделу прикладной иммунологии, его состоянию и перспективам развития. Важнейшей предпосылкой эффективности любых противоэпидемических мероприятий является своевременное прогнозирование и обнаружение моментов активизации тех экологических и социально-экологических взаимодействий, которые составляют существо эпидемических процессов.

Исключительное разнообразие, свойственное последним и требующее дифференциации противоэпидемических мероприятий, обусловлено не только самобытностью каждой из существующего множества инфекционных болезней. Очень большое значение имеет в этом отношении фундаментальное явление гетерогенности популяций, входящих в состав соответствующих экологических и социально-экологических систем микроб-жертва. Вариабильность этих весьма сложных биосоциальных факторов и условий в очень большой мере влияет на специфику того или иного этапа существования каждого эпидемического процесса. И своевременное распознавание этих особенностей, осуществляемое, как правило, с использованием иммунологических методов, обеспечивает ту дифференциацию противоэпидемических мероприятий. Экспресс-индикация - это своеобразная разведка большой армии лабораторной диагностики.

Она находится на переднем крае научного поиска новых, простых, экономичных, быстрых методов индикации микробов, часть из которых в дальнейшем идет на вооружение лабораторной практики и благодаря этому последняя все время совершенствуется. Основные объективные требования к экспрессным методам диагностики инфекционных заболеваний сводятся к следующему: 1. Получение результатов анализа в максимально короткие сроки (часы, идеально-минуты); 2.

Возможность проведения и завершения анализа без выделения искомого микроорганизма в чистой культуре, при использовании только нативного материала, в крайнем случае-с привлечением элективных биосред для быстрого накопления возбудителей; 3. Бесспорно высокая специфичность и высокая чувствительность, как предпосылки надлежащей достоверности анализа; 4. Высокая производительность, простота, доступность и воспроизводимость анализов.

Эти требования в равной мере приложимы и к методам экспрессной диагностики состояний иммунитета. Предпочтительность использования того или иного из существующих методов экспресс-диагностики зависит от многих конкретных условий.

Однако наиболее желательным является параллельное использование 2-3 методов. Такой подход значительно увеличивает надежность получаемого результата. На ближайшие годы наиболее перспективными следующие направления развития экспресс-индикации микроорганизмов.

Энзимоиндикационное направление, связанное с экспресс-индикацией биохимических свойств и определением ферментативного спектра микробов. По-прежнему сохранят свою значимость исследования по разработке политропных (полисубстратных) питательных сред. В нашей стране были разработаны оригинальные политропные среды и их комбинации, которые с успехом применяются в лабораторной практике. При создании сложных поликомпонентных питательных систем необходимо исходить из различных биохимических и энергетических потребностей микроорганизмов. Для лучшего проявления жизнедеятельности и биохимической активности патогенных и других микробов в средах необходимо создавать оптимальные условия для их роста и размножения и одновременно вводить ферментируемые субстраты (углеводы, многоатомные спирты, аминокислоты и др.) с наиболее чувствительными индикаторами, которые быстро бы регистрировали их ферментацию.

В результате применения оптимальных полисубстратных сред производится выделение и накопление чистой культуры микробов с одновременным определением их биохимических признаков. Перспективным следует рассматривать развитие энзимоиндикационных методов, в которых субстрат с индикатором отделен от питательной среды и фиксирован на специальном носителе. В нашей стране разработаны углеводно-бумажные диски с защитной пленкой (бумажные реагенты для определения дезаминаз у микробов) и их аналоги БИС (бумажно-индикаторные системы), углеводно-бумажные поплавки, углеводно-полимерные пленки.

Все эти препараты являются весьма перспективными, они позволяют в течение кратчайшего срока (3-5 ч), используя общепринятые питательные среды и лабораторную посуду, определять ферментативную активность различных видов микроорганизмов. Автономный препарат - карандаш-фермент, не имеющий аналогов ни у нас, ни за рубежом, позволяет без применения питательных сред непосредственно на предметном стекле определять биохимические свойства микробов. Полисубстратная тест-система и энзимоиндикаторная лента используются для одновременной идентификации 20 биохимических признаков у микробов.

Это новые виды простых 'долгоживущих' препаратов, предназначенных для быстрого и экономичного определения биохимических свойств микробов. Электрофизический метод определения ферментативной активности микробов включает посев микробной культуры на жидкие питательные среды, содержащие пептонную воду, различные углеводы, многоатомные спирты, аминокислоты с последующим ферментативным расщеплением исследуемых веществ и образованием различных ионизированных продуктов распад по природе, форме и величине виды мелкодисперсных носителей (сорбентов) антигенов и антител, способствующих повышению чувствительности комплексных иммунологических методов. Реакции пассивной гемагглютинации и их модификации связаны с использованием эритроцитарных диагностических препаратов. Эритроцитарную диагностику с успехом применяются для ускоренного обнаружения и идентификации как патогенных, так и условно-патогенных микроорганизмов (например, возбудителей туляремии, бруцеллеза, сальмонеллеза и др.) в различных патологических материалах, получаемых от больных, и в объектах внешней среды. Реакции с эритроцитарными диагностикумами являются весьма чувствительными, и в этом отношении часто превосходят другие серологические реакции.

Они введены в официальные инструкции по экспресс-индикации бактериальных агентов в элементах внешней среды и в материалах, полученных от пораженных людей и животных. Одновременно продолжаются поиски новых носителей антигенов и антител, которые были бы безантигенными, стабильными, не разрушающимися при длительном хранении, а применяемые реакции - простыми по технике постановки (например, стекольные тесты) и исследования с их помощью - экономичными. Совершенствуются реакции с применением цветных целлюлозных частиц в качестве носителей антигенов и антител. Положительными свойствами такого рода препаратов являются: отсутствие собственной антигенности; стабильность при длительном хранении; демонстративность и простота техники постановки реакции, обычно на предметном стекле; высокая скорость прохождения реакции; экономичность. Кроме того, полезным и оправданным считаем поиск новых носителей антигенов и антител.

В этом отношении перспективными являются ионообменные смолы, латексы, целлюлоза и ее производные и ряд других веществ, которые могут способствовать повышению чувствительности серологических реакций. Иммунохимическое направление, связанное с использованием разнообразных комплексных соединений специфических антител или антигенов с химическими веществами.

Присоединенные химические вещества придают им новые феноменологические способности и свойства, тем самым, расширяя возможности экспресс-индикации микробных агентов в частности и лабораторного анализа вообще. Большую популярность и практическую значимость приобрели методы быстрого иммунофлуоресцентного анализа (прямой, непрямой, антикомплементарный), которые ныне официально используются как методы экспрессной индикации и быстрого определения микроорганизмов. Дальнейшее развитие весьма перспективного иммунохимического направления во многом зависит от химиков, которые должны разработать достаточно яркие новые красители, вступающие в соединения со специфическими антителами и антигенами. В результате могут быть получены препараты с новыми феноменологическими свойствами, позволяющими проводить экспресс-индикацию микробных культур и отдельных клеток с помощью широко распространенных микроскопических устройств (типа МБИ различных марок).

Реферат На Тему Особо Опасные Инфекции

Иммуноферментное направление, интенсивно развивающееся в последние годы. Разработаны прямой, непрямой, антикомплементарный и другие методы быстрого обнаружения микробов путем использования иммуноэнзимологического принципа; предложены новые виды ферментов, а также разнообразные виды хромогенных субстратов. Данное направление является весьма перспективным, развитие его может привести в ближайшие годы к появлению новых методов экспресс-индикации микроорганизмов. Иммуноэлектрофоретическое направление успешно развивается с конца 50-х годов. Разработаны многочисленные методы иммуноэлектрофореза. Однако для целей экспресс-индикации микробов чаще прибегают к встречному иммуноэлектрофорезу. Применение новых химических красителей, ферментной или радиоактивной метки позволит резко повысить чувствительность метода иммуноэлектропреципитации.

Иммунорадиологическое направление связано с использованием разнообразных конъюгатов специфических антител или антигенов, соединенных с радиоактивными веществами, которые придают им новые феноменологические свойства и способности, р установить природу возбудителя даже в тех случаях, когда другими методами, в виду его изменчивости или загрязненности материала, он остается нераспознанным. Биологическое направление, связанное с изучением токсических и агрессивных свойств патогенных микроорганизмов.

Биологические методы осуществляются на одноклеточных организмах, на культурах клеток, куриных эмбрионах, а также на здоровых, а еще лучше специально подготовленных лабораторных животных. Эти методы более трудоемкие и менее точные по сравнению с другими. Физико-химическое направление. Это направление связано с использованием сравнительно быстрых, но в то же время и достаточно сложных по аппаратурному оформлению методов. Сюда входят методы изучения бактериальных популяций и их экстрактов с помощью хроматографии (газожидкостная и др.), спектроскопии (инфракрасной, ультрафиолетовой и др.), резистографии в отношении различных антибиотических, химических и лекарственных веществ, а также методы температурной и кислотной агрегации, коагуляции микробных суспензий и их токсинов. Рецепторное и генетическое направления быстрой индикации патогенных и санитарно-показательных микроорганизмов. Методы, основанные на этих принципах, только начинают развиваться.

Карантинные Инфекции

Так, с помощью целлюлозно-глобулинового или эритроцитарно-глобулинового диагностикумов быстро обнаруживают патогенный стафилококк, содержащий белок А, а путем гомологии неизвестных нуклеиновых кислот с известными нуклеиновыми кислотами устанавливают вид патогена. Комплексное направление ускоренной идентификации патогенных и санитарно-показательных микроорганизмов, использующее методы экспресс-индикации, основанные на интеграции различных принципов, связано с разработкой и созданием индикаторных тест-систем, позволяющих в течение короткого срока и с минимальными затратами на анализ определить комплекс основных признаков патогена или санитарно-показательного представителя, достаточных для его идентификации до рода, вида и даже типа. Направления, связанные с разработкой новых принципов микробиологического анализа. Вполне вероятно, и мы вправе ожидать в ближайшие 5-10 лет появления новых идей, подходов и принципов в микробиологической науке и смежных с ней областях. Открытие новых видов рецепторной, иммунологической и генетической специфичности у микробов позволит создать новые и возможно более совершенные методы быстрой идентификации микроорганизмов.

Основные пути развития экспресс-индикации микроорганизмов на ближайшие годы: создание и конструирование новых препаратов, способствующих ускорению и удешевлению исследований, повышению эффективности лабораторной диагностики инфекций и индикации патогенных и других микроорганизмов. На этом пути предстоит сделать очень многое, поскольку общепринятые диагностические препараты в значительной степени исчерпали свои потенциальные возможности; разработка новых более чувствительных, простых методов лабораторного анализа. Разработка комплексных методов и видов исследований. Будет продолжаться дальнейшая интеграция методов и видов исследований, имеющих разные принципы действия, лежащие в их основе; создание новых схем исследований.

Поскольку лабораторная диагностика инфекционных болезней, а также экспресс-индикация, хотя и в меньшей степени, связаны с изучением комплекса различных свойств и особенностей микроорганизмов с использованием обычно разнообразных методов и приемов, основанных на различных принципах, то создание новых схем исследований с применением новых методов является объективной реальностью и важной задачей, вытекающей из существа самого процесса развития микробиологического анализа; разработка и создание новых методов регистрации и учета результатов экспресс-индикационных и лабораторных исследований. Разработка новой микроминиатюрной лабораторной посуды, аппаратуры и приборов для исследований; автоматизация и компьютеризация исследований. В современных условиях эти вопросы должны решаться комплексно. Таким образом, рассмотре от 10 лиц. Флаконы помещают в термостат при 370С. Через 3 - 4 часа холерные вибрионы начинают агглютинироваться и постепенно (в течение ближайших 2 часов) падают в виде хлопьев на дно флакона.

Исследуя под микроскопом окрашенные мазки и 'висячую каплю', обнаруживают склеившихся и частично свободных вибрионов. Через 6 часов дается ответ и в случае обнаружения холерных вибрионов немедленно производится посев индивидуально от каждого из 10 лиц. Такой метод дает возможность исследовать до 16 000 человек за 3 - 4 дня. Метод иммунодиагностической микропленки. Изучение антигенных свойств холерных вибрионов проводят путем постановки пробирочной или пластинчатой реакции агглютинации с использованием сухих лиофилизированных диагностических агглютинирующих холерных 0-сывороток и сывороток Огава и Инаба. Сыворотку разводят в физиологическом растворе или дистиллированной воде и смешивают при постановке агглютинации на стекле с исследуемой культурой вибрионов.

При подготовке сыворотки используется дополнительная посуда, что усложняет работу бактериолога, а в оставшейся разведенной сыворотке быстро прорастает бактериальная микрофлора и инактивирует ее. Для изучения антигенной структуры холерных вибрионов были разработан иммунодиагностический препарат в виде микропленок разового применения, который обладал достаточной специфичностью, демонстративностью и экономичностью. Иммунодиагностические холерные микропленки (ИХМП) в виде полимерной пленки с нанесенными высушенными каплями, фиксированными на бумаге, содержат минимальное количество сыворотки, пленкообразующий компонент и консервант. Пленкообразующий компонент связывает, склеивает и фиксирует микроколичества ингредиентов к поверхности носителя, исключает крошение микропленок; консервант предохраняет препарат от разрушения при длительном хранении.

Концентрация диагностической сыворотки в ИХМП является достаточной, поскольку после эмульгирования в капле физраствора, антитела содержатся в титре 1:100, что полностью обеспечивает ход реакции. Тем самым обеспечивается достаточная концентрация антител, снижается, расход диагностической сыворотки и исключается возможность ее неиспользования. При этом создаются условия для быстрого растворения ИХМП, контакта ее с холерными вибрионами и проведения реакции непосредственно на полимерной пленке. Готовые ИХМП хранят в темном сухом месте при 4- 7°С в картонных коробках (срок годности 3 года - срок наблюдения) и по мере надобности ИХМП используют для определения холерных вибрионов.

Для исключения случайного заражения окружающих предметов ИХМП помещают в чистую чашку Петри. На поверхность ИХМП наносят каплю физиологического раствора, в которой растворяют ее. Разведенную сыворотку смешивают с изучаемой культурой вибрионов, снятой бактериологической петлей с питательной среды. При другом варианте постановки реакции ИХМП снимают скальпелем с бумажной подложки и переносят на предметное стекло, растворяют в капле физиологического раствора и смешивают с изучаемой культурой вибрионов.

При положительной реакции через 1-3 мин появляются зерна агглютината, окрашенные в зеленый цвет, а капля просветляется. При отрицательной реакции капля остается гомогенно-мутной.

Использованную часть полимерной пленки отрезают, а оставшуюся часть пленки с ИХМП сохраняют в той же чашке Петри для дальнейших исследований. Использование ИХМП в исследованиях вибрионов и других микроорганизмов позволяет получить статистически достоверные результаты, сэкономить дорогостоящие диагностические сыворотки, повысить качество и эффективность исследований. Реакция агглютинации микрометодом. В последнее время в бактериологической практике нашел довольно широкое применение микрообъемный метод постановки серологических реакций с использованием специальных планшеток и микротитровальных игл. Реакции агглютинации микрометодом ставят с холерными агглютинирующими референс-сыворотками в полистроловых микротитровальных планшетках с плоским или V-образ-ным дном, предназначенных для иммунологическ агглютинировались в планшетках и пробирках соответственно в 95 и 96% случаев. У холерных вибрионов классического и эльтор биоваров серовара Огава соотношения в обеих методиках были практически те же. Интересен факт, что при постановке реакции агглютинации с RO-сывороткой наибольшее число штаммов, агглютинирующихся RO-сывороткой до титра, было выявлено в микрометоде; в пробирках агглютинация установлена у одного штамма.

Все штаммы вибрионов 040-056 сероваров в микрометоде не агглютинировались холерными агглютинирующими сыворотками, а в пробирках штамм II 258-1099 (040 серовара) агглютинировался всеми холерными сыворотками. Большинство изученных штаммов представителей семейства Enterobacteraceae также не агглютинировалось холерными агглютинирующими сыворотками, за исключением Sh. Flexneri 2503, у которого в пробирках была выявлена агглютинация со всеми сыворотками, и штамма S. Typhimurium 21, у которого отмечена неспецифическая реакция агглютинации со всеми сыворотками как в пробирках, так и в планшетках. При пользовании этим методом расход агглютинирующих сывороток уменьшается в 10 раз, значительно сокращается время, необходимое для постановки реакции, и ускоряется срок выдачи ответа. Кроме того, описанный метод менее трудоемок.

Таким образом, стандартность, достоверность полученных результатов, высокая экономичность метода позволяют рекомендовать его при идентификации холерных вибрионов, изучении штаммов и популяции штаммов холерных вибрионов по признаку агглютинабельности. А также: Иммобилизация вибрионов холерными сыворотками и типовыми холерными фагами. Капли испражнений или материала с поверхности пептонной воды обрабатывают холерной О-сывороткой, типовыми сыворотками Огава и Инаба или типовыми холерными фагами. Готовят из них препараты 'раздавленная капля', которые исследуют с помощью темнопольной и фазовоконтрастной микроскопии. В положительном случае через 3-5 минут движение вибрионов прекращается. Препараты из исследуемого материала обрабатывают флюоресцирующей противохолерной сывороткой и исследуют в люминесцентном микроскопе. Положительным результатом считается обнаружение в препарате даже единичных вибрионов с ярким желто-зеленым свечением в виде блестящего ободка по периферии клетки.

Положительный результат можно получить через 1-2 часа после начала исследования при концентрации вибрионов не менее 106 клеток в 1 мл., поэтому рекомендуется предварительно подращивание материала на питательных средах. Экспресс-диагностика туляремии Возбудитель туляремии (Туляре - район Калифорнии) - Franciella tularensis относится к роду с невыясненным положением в систематике микробов. Этиологическая природа туляремии была установлена в 1912 году Г.Мак-коем и Ш.Чепиным, а далее подробно изучена Э.Франсисом. Туляремия Туляремия - тяжелая кровяная зоонозная инфекция с природной очаговостью. Основные источники инфекции - водяные крысы, ондатры, зайцы, крысы, мыши. Больной человек неконтагиозен и для возбудителя является биологическим тупиком.

Передается трансмиссивным путем через клещей, а нередко и контактным, алиментарным или аспирационным путем. Возбудитель содержит нуклеопротеидный О- и оболочечный белково-липидный Vi-антиген. У перенесших болезнь вырабатывается очень напряженный и длительный иммунитет. Материал для исследования: кровь, гной, пунктат бубона, слизь из зева. Реакция агглютинации-рассеивания. Предложена простая, быстрая, высокочувствительная и специфичная реакция агглютинации-рассеивания, для постановки которой используется антительный диагностикум. Это суспензия темно-коричневого цвета, представляющая собой комплексное соединение шаровидных крупнодисперсных НК-частиц (Никитин и Котич) и противотуляремийных иммуноглобулинов.

Препарат хранят в холодильнике при 4°С в течение 2-3 лет. По истечении 3 лет препарат можно ресенсибилизировать, так как НК-частицы высокостабильны.

Для постановки реакции агглютинации-рассеивания на тщательно обезжиренное предметное стекло наносят слева относятся также Y. Pseudotuberculosis и Y.

Enterocolitica, вызывающие септические гастроэнтероколиты или иерсиниозы. Чума Чума - особо опасная, очень тяжелая кровяная инфекция, склонная к широкому распространению и дающая высокий процент смертности (от 20 до 100%). Это зоонозная трансмиссивная природно-очаговая инфекция. Источники - крысы, суслики, песчанки, полевки, сурки, мышевидные грызуны. Переносчики - кровососущие насекомые.

В составе бактерий чумы содержится более полутора десятков специфических и групповых антигенов. Переболевшие приобретают пожизненный, устойчивый иммунитет фагоцитарного характера. Материал для исследования: содержимое бубонов, отделяемое язв, мокрота, кровь, испражнения.

Метод бумажных индикаторных систем. Классические методы (посев на среды Гисса) громоздки, требуют много времени и большого количества питательных сред, имеющих ограниченный срок годности.

В настоящее время эти методы не удовлетворяют запросам противочумной системы. В настоящее время наиболее перспективным методом определения ферментативной активности штаммов возбудителя чумы с целью идентификации выделяемых культур и изучения их свойств можно считать метод углеводно-бумажных дисков, предложенный В.М.Никитиным и С.В.Плугару. В качестве среды лучше использовать бульон Хоттингера, т.к. Он дает наиболее быструю ферментацию - 3 часа. Целесообразно применять БИС в полевых условиях, так как наборы компактны и могут длительное время храниться при комнатной температуре. Внесение бактериофага в исследуемый материал в момент его посева на агар с генцианвиолетом позволяет обнаружить под микроскопом негативные колонии фага или 'дорожку' в первые часы, когда рост бактерий еще почти не заметен (через 2,5 - 3 часа).

Метод прост, доступен и дает хорошие результаты при высокой концентрации чумного микроба и при относительно большом содержании посторонних микроорганизмов. Определение нарастания титра чумного фага, вносимого в исследуемый материал, где в случае наличия возбудителя фаг начинает размножаться уже через 30-40 минут. В жидкий исследуемый материал (25-50-100 мл) и в контрольную жидкость добавляют столько фага, чтобы получить его разведение 1:50 - 1:100; ставят пробы в термостатах при 370C на 45-60 минут. После инкубации берут 0,5 мл жидкости из каждой пробы и разводят бульоном в 10 раз; из этого первого разведения фага готовят серию последовательных 10-кратных разведений (до 10-10 - 10-11).

Скачать Реферат На Тему Особо Опасные Инфекции

По 0,5 мл жидкости из каждого разведения исследуемого и контрольного рядов добавляют к 2,5 мл полужидкого агара (0,1%), предварительно расплавленного и затем охлажденного до 48-500С. Тут же к агару добавляют 0,1 - 0,2 мл взвеси 1 - 2 суточной индикаторной культуры (вакцинный штамм чумного микроба), содержащий 15-20 млрд микробов в 1 мл. Содержимое пробирок тщательно перемешивают и выливают на чашки Петри с 2% агаром Хоттингера. После того, как полужидкий агар застынет, чашки перевертывают дном кверху и ставят в термостат при 370С. Учет результатов производят через 3-4 часа. На фоне сплошного роста индикаторной культуры видны стерильные пятна (негативные колонии фага), количество которых на чашках с исследуемым материалом может превосходить в 100-1000 и более раз число негативных колоний на контрольных чашках.

Благодаря хорошей диффузии фаговых частиц и бактериальных клеток через полужидкий агар двухслойный метод дает стерильные пятна большего размера, чем при размазывании исследуемой массы шпателем по поверхности агара. Подсчет колоний ведут в счетной камере. А также: РИФ, РПГА и др.

Некоторые другие методы Хемилюминесцентный иммуноанализ. Новым этапом на пути развития иммунологических методов диагностики ООИ является хемилюминесцентный иммуноанализ - ХЛИА. Преимущество этого метода определяется его высокой чувствительностью, относительной простотой и производительностью, возможностью полной автоматизации В открытой литературе имеются отдельные сообщения, посвященные применению ХЛИА в медицинской микробиологии, как для обнаружения бактериальных антигенов, так и Специфичность ХЛИА зависит от качества использованных иммуноглобулинов. На 42 близкородственных и гетероло-гичных штаммах положительные реакции получены с Y. Pseu-doTuberculosis 816111(37°) с чумными общими ИПК и В. Sereus 1 и 3 с сибиреязвенными ИПК в концентрациях 1 -106 м. ХЛИА следует рекомендовать для лабораторной диагностики ООИ особенно в тех случаях, когда в исследуемом материале предполагается незначительное содержание возбудителя.

Иммуноблотинг Иммуноблоттинг - разновидность гетерогенного иммунного анализа. Сущность его заключается в переносе молекул исследуемого вещества с одного твердого носителя, используемого для фракционирования биополимеров, на другой, где с помощью иммунохимической реакции происходит их специфическое выявление.

В зависимости от исследуемого вещества различают ДНК,- РНК и белок - блоттинг.